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產品詳情
操作說明
注意事項
產品信息
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產品名稱 |
產品編號 |
規格 |
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DNase I (RNase Free) |
M0k942138 |
200U |
產品描述
DNase I（Deoxyribonuclease I，脫氧核糖核酸酶 I）是一種核酸內切酶，可以將單鏈、雙鏈DNA降解為5'-磷酸、3'-羥基末端的單脫氧核苷酸或者寡核苷酸；DNase I的活性依賴鈣離子，能夠被鎂離子和二價錳離子激活；鎂離子存在條件下，DNase I可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；二價錳離子存在條件下，DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個核苷酸突出的粘末端。
主要用途：制備不含DNA的RNA樣品；
RT-PCR反應前RNA樣品中基因組DNA殘留去除；
體外T7，T3，SP6等RNA Polymerases催化的RNA轉錄后體系中DNA模板去除；
缺口平移（nick translationin）DNA標記；
產生DNA隨機片段文庫；
細胞凋亡Tunel檢測中部分剪切基因組DNA作為實驗陽性對照等。
特點：特異性降解DNA，不降解RNA。
酶活性定義：在37℃孵育10 min將1 μg pBR322載體DNA全部降解所需酶量定義為一個酶活單位。
失活或抑制：加入EDTA后，65℃加熱10 min可使DNase I充分失活，酚LF抽提也可使DNase I失活。
純度：SDS-PAGE檢測純度≥95%，無RNase，1 U/μL。
酶儲存緩沖液：10 mM Tris-HCl，2 mM CaCl2，50% Glycerol，pH 7.6。
10×DNase I Reaction Buffer：100 mM Tris-HCl，25 mM MgCl2，5 mM CaCl2，pH 7.6。
儲存與運輸
冰袋（wet ice）運輸；-20℃保存，有效期12個月。
組成
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Component Number |
Component |
G3342-200U |
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G3342-1 |
DNase I (RNase free) |
200 U |
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G3342-2 |
10×DNase I Reaction Buffer |
1 mL |
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G3342-3 |
25 mM EDTA |
250 μL |
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產品說明書 |
1份 | |
參考使用
1. 參考反應體系：
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RNA樣品 |
1 μg |
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DNase I |
1 U |
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10×DNase I Reaction Buffer |
1 μL |
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RNase free Water |
To 10 μL |
2. 配制反應完成后，輕輕混勻，隨后將液體離心至管底；
3. 37℃孵育30 min，反應完后在反應體系中加入1 μL 25 mM EDTA終止反應；
4. 65℃孵育10 min使DNase I完全失活。
注意事項
1. 使用該產品時應將酶置于冰盒或冰浴中，使用完畢后立即于-20℃保存。
2. DNase I反應體系可參考實驗需求以及實際應用產品相應使用說明調整。
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
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